شکل ۳-۲ پوشش میسلیوم قارچ خالص سازی شده درسطح ظروف kolle
۳-۳ قرار دادن نمونه های چوبی در مجاورت قارچ کشت داده شده
جهت قراردادن نمونه ها در مجاورت قارچ خالص سازی شده رنگین کمان تعداد ۳۵ عدد ظرف شیشه ای کوله[۴۳] تهیه و سپس محیط کشت مالت استراکت آگار تهیه گردید (با شرایطی که قبلاً گفته شد). همانطور که قبلا هم گفته شد به مقدار مورد نیاز محلول مالت استراکت آگار تهیه و به اندازه ۶۰ سی سی در هر ظرف کوله ریخته و ظروف را در انکوباتور با شرایطی که گفته شد قرار می دهیم تا منعقد و ژله ای شده و آماده کشت شود. بعد از این مرحله مقداری از قارچ خالص سازی شده را در درون ظروف کوله قرار می دهیم و بلافاصله درب آن را می بندیم و .پس از یک هفته با شرایط گفته شده سطح ظرف را میسلیوم می پوشاند و کاملا آماده برای انتقال چوب به درون آن خواهد بود.
(( اینجا فقط تکه ای از متن درج شده است. برای خرید متن کامل فایل پایان نامه با فرمت ورد می توانید به سایت feko.ir مراجعه نمایید و کلمه کلیدی مورد نظرتان را جستجو نمایید. ))
از آنجایی که نباید نمونه های چوبی به طور مستقیم با محیط کشت در تماس باشد برای هر ظرف کوله دو پایک شیشه ای کوچک به ضخامت ۳ میلیمتر تهیه و استریل گردید ، ظروف کوله پایک های شیشه ای و نمونه ها را داخل اتاق کشت قرار داده تا محیط و صفحه کار را برای قرار دادن نمونه ها در ظروف کوله آماده کنیم ،لذا میز کار و دستان خود را با الکل استریل کردیم. سپس درپوش ظروف کوله را در شرایط حرارت در کنار شعله برداشته و دهانه ظرف را بر روی شعله چرخانده و در همین زمان نوک پنسی را هم روی شعله چرخاند و به وسیله آن پایک های شیشه ای استریل شده را داخل آن گذاشته (برای هر ظرف کوله دو عدد پایک شیشه ای قرار می گیرد.) سپس نمونه های چوبی را تک تک از داخل فویل آلومینیومی (در شرایط استریل در کنار شعله) درآورده و دهانه ظرف کوله را مجددا بر روی شعله چرخانده دو نمونه چوبی را داخل آن قرار می دهیم و درب ظروف کوله را می بندیم و برای اطمینان کد هر نمونه چوبی با برچسب بر روی ظروف ثبت شد.(قابل ذکر است قبل از قرار گرفتن نمونه های چوبی داخل محیط کشت آنها را فویل آلومینیومی پیچیده و به مدت ۲۴ ساعت داخل اتو خشک و استریل گردید).
محیط های کشت را در درون انکوباتور قرار داده تا در شرایط رطوبت نسبی و دما مورد نظر تحت کنترل بماند (البته دستگاه از قبل تست و کنترل شده). به تدریج سطح تمامی نمونه های چوبی را میسیلیوم قارچ پوشاند به طوری که در زیر پوشش سفید رنگ میسیلیوم این قارچ نمونه های چوبی به سختی قابل مشاهده بودند. بعد از گذشت ۱۴ هفته ظروف از انکوباتور خارج و نمونه های چوبی بیرون آورده شد. سپس درصد پوشش میسیلیوم ها و چگونگی اثر ناخن بر روی سطح نمونه ها و وزن خشک نمونه ها محاسبه و ثبت گردید.
۳-۴ بررسی نمونه ها پس از خروج از ظروف کوله
بعداز این که نمونه های چوبی را بعد از ۱۴ هفته از انکوباتور و از داخل ظروف کوله خارج ساختیم ابتدا میزان پوشش میسیلیوم بر روی نمونه های چوبی به ترتیبی که گفته خواهد شد ثبت گردید سپس اثر میسیلیوم های قارچ از روی نمونه های چوبی پاک شده و چگونگی اثر ناخن بر روی سطوح نمونه ها ارزیابی شد.
۳-۴-۱ تعیین میزان خسارت ظاهری و محاسبه درصد کاهش جرم
معیار ولیت نیر[۴۴] معیاری است برای تعیین میزان خسارت ظاهری وارده بر هر نمونه که این کار را با توجه به جدول ۲-۳ انجام می دهیم
جدول۳-۲ معیار willeitner برای تعیین میزان خسارت ظاهری
| شدت خسارت | معیار |
| هیچ گونه خسارتی وارد نشده است | ۱ |
| در چند نقطه خسارت وجود دارد | ۲a |
| در تمام نقاط خسارت جزئی است | ۲b |
| در چند نقطه خسارت شدید است | ۳a |
| در تمام نمونه خسارت شدید است | ۳b |
| چند نقطه کاملاً تخریب شده است | ۴a |
| تمام نمونه کاملاً تخریب شده است | ۴b |
بعد از این که خسارت وارده طبق معیار ولیت نیر محاسبه شد و ثبت گردید نمونه های چوبی را در داخل اتو در حرارت ۱۰۵ درجه سانتی گراد به مدت ۲۴ ساعت گذاشته و بعد از گذشت این مدت وزن خشک هر یک از نمونه ها بدست آمد. با توجه به اینکه وزن خشک نمونه ها را قبل از کشت محاسبه کرده بودیم و بعد از کشت هم که بدست آورده ایم، لذا کاهش جرم را به صورت زیر می توان محاسبه کرد :
۳-۴-۲ طبقه بندی دوام طبیعی چوب فندلای[۴۵]
جهت طبقه بندی دوام طبیعی نمونه های چوبی از روش فندلای استفاده گردید
